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細(xì)胞株培養(yǎng)傳代時的指數(shù)增生期解讀

原載自:m.tljr.com.cn[技術(shù)資料頻道]  2021-01-15  瀏覽次數(shù):1610

   細(xì)胞株的培養(yǎng)所謂細(xì)胞“一代”系僅指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)時的一段時間,這已成為培養(yǎng)工作中的一種習(xí)慣說法,它與細(xì)胞倍增一代非同一含義。如某一細(xì)胞系為第153代細(xì)胞,即指該細(xì)胞系已傳代153次。它與細(xì)胞世代或倍增不同。在細(xì)胞一代中,細(xì)胞能倍增3-6次。
  細(xì)胞株培養(yǎng)時指數(shù)增生期是細(xì)胞增值旺盛的階段,細(xì)胞分裂相增多。指數(shù)增生期細(xì)胞分裂相數(shù)量可作為判定細(xì)胞生長旺盛與否的一個重要標(biāo)志。一般以細(xì)胞分裂表示,即細(xì)胞群中每1000個細(xì)胞中的分裂相數(shù)。體外培養(yǎng)細(xì)胞分裂指數(shù)受細(xì)胞種類、培養(yǎng)液成分、pH、培養(yǎng)箱溫度等多種因素的影響。一般細(xì)胞的分裂指數(shù)介于0.1%-0.5%,初代細(xì)胞分裂指數(shù)低,連續(xù)細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞分裂指數(shù)可高達(dá)3%-5%。pH和培養(yǎng)液血清含量變動對細(xì)胞分裂指數(shù)有很大影響。指數(shù)增生期是細(xì)胞一代中活力好的時期,因此是進(jìn)行各種實驗好的和主要的階段。
  在接種細(xì)胞數(shù)量適宜情況下,指數(shù)增生期持續(xù)3-5天后,隨細(xì)胞數(shù)量不斷增多、生長空間漸趨減少、后細(xì)胞相互接觸匯合成片。細(xì)胞相互接觸后,如培養(yǎng)的是正常細(xì)胞,由于細(xì)胞的相互接觸能抑制細(xì)胞的運動,這種現(xiàn)象稱接觸抑制。而惡性細(xì)胞則無接觸抑制現(xiàn)象,因此接觸抑制可作為區(qū)別正常與癌細(xì)胞標(biāo)志之一。腫瘤細(xì)胞由于無接觸抑制能繼續(xù)移動和增殖,導(dǎo)致細(xì)胞向三維空間擴展,使細(xì)胞發(fā)生堆積。細(xì)胞接觸匯合成片后,雖發(fā)生接觸抑制,只要營養(yǎng)充分,細(xì)胞仍然能夠進(jìn)行增殖分裂,因此細(xì)胞數(shù)量仍在增多。但當(dāng)細(xì)胞密度進(jìn)一步增大,培養(yǎng)液中營養(yǎng)成分減少,代謝產(chǎn)物增多時,細(xì)胞因營養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響,則發(fā)生密度抑制,導(dǎo)致細(xì)胞分裂停止。因此細(xì)胞接觸抑制和密度抑制是兩個不同的概念,不應(yīng)混淆。

 

 

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