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技術(shù)文章 / article
對細胞株的污染鑒定與處理解讀
原載自：[技術(shù)資料頻道] 2022-09-09 瀏覽次數(shù)：825
細胞株的無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可暫時放置，其它實驗用品用完即應(yīng)移出，以利于氣流之流通。實驗用品以70%酒精擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在抬面之中央無菌區(qū)域，勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。
實驗室環(huán)境的污染也會造成細胞株培養(yǎng)的污染，所以實驗室環(huán)境要定期進行消毒。例如試驗臺、超凈臺、培養(yǎng)箱、液氮罐、移液器、門把手、電話等細胞培養(yǎng)環(huán)境被支原體污染，可引起細胞的污染。應(yīng)定期對工作區(qū)域進行消毒。
在細胞培養(yǎng)過程中，支原體感染發(fā)生率達到63%，因而細胞培養(yǎng)過程中被支原體污染是一個世界性的難題。細胞培養(yǎng)中常遇見的有細菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染等。說起支原體污染，估計細胞株培養(yǎng)的老手都知道，支原體污染非常不易察覺。有的實驗室被支原體污染后，如果不進行有效*的支原體清除，該實驗的細胞培養(yǎng)很難進行下去，細胞傳三代以后狀態(tài)就急劇下滑，無法進行正常實驗，有的實驗室甚至只能指望換細胞間。
怎樣有效檢測并清除支原體污染呢？
支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染、培養(yǎng)的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。細胞培養(yǎng)工作中，主要從控制環(huán)境污染、嚴(yán)格實驗操作、細胞培養(yǎng)和器材要保證無菌以及在細胞培養(yǎng)中加入適量的抗生素來預(yù)防支原體的污染。
如果受到支原體污染時，細胞形態(tài)較之無明顯變化，極易被忽視，往往直到污染非常嚴(yán)重時才能發(fā)現(xiàn)。受污染的細胞膜上可能有幾百個支原體，這些支原體競爭營養(yǎng)并釋放有毒的代謝產(chǎn)物，嚴(yán)重影響實驗結(jié)果。
