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對(duì)細(xì)胞株的污染鑒定與處理解讀

原載自:m.tljr.com.cn[技術(shù)資料頻道]  2022-09-09  瀏覽次數(shù):1122

   細(xì)胞株的無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可暫時(shí)放置,其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出,以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70%酒精擦拭后才帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之中央無(wú)菌區(qū)域,勿在邊緣之非無(wú)菌區(qū)域操作。
  實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的污染也會(huì)造成細(xì)胞株培養(yǎng)的污染,所以實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要定期進(jìn)行消毒。例如試驗(yàn)臺(tái)、超凈臺(tái)、培養(yǎng)箱、液氮罐、移液器、門(mén)把手、電話等細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境被支原體污染,可引起細(xì)胞的污染。應(yīng)定期對(duì)工作區(qū)域進(jìn)行消毒。
  在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,因而細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中被支原體污染是一個(gè)世界性的難題。細(xì)胞培養(yǎng)中常遇見(jiàn)的有細(xì)菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染等。說(shuō)起支原體污染,估計(jì)細(xì)胞株培養(yǎng)的老手都知道,支原體污染非常不易察覺(jué)。有的實(shí)驗(yàn)室被支原體污染后,如果不進(jìn)行有效*的支原體清除,該實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞培養(yǎng)很難進(jìn)行下去,細(xì)胞傳三代以后狀態(tài)就急劇下滑,無(wú)法進(jìn)行正常實(shí)驗(yàn),有的實(shí)驗(yàn)室甚至只能指望換細(xì)胞間。
  怎樣有效檢測(cè)并清除支原體污染呢?
  支原體污染的來(lái)源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染、培養(yǎng)的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來(lái)的污染和用來(lái)制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從控制環(huán)境污染、嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作、細(xì)胞培養(yǎng)和器材要保證無(wú)菌以及在細(xì)胞培養(yǎng)中加入適量的抗生素來(lái)預(yù)防支原體的污染。
  如果受到支原體污染時(shí),細(xì)胞形態(tài)較之無(wú)明顯變化,極易被忽視,往往直到污染非常嚴(yán)重時(shí)才能發(fā)現(xiàn)。受污染的細(xì)胞膜上可能有幾百個(gè)支原體,這些支原體競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)并釋放有毒的代謝產(chǎn)物,嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

 

 

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