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ATCC細(xì)胞的生存空間及營(yíng)養(yǎng)是有限的
原載自:[行情動(dòng)態(tài)] 2016-12-21 瀏覽次數(shù):1300
培養(yǎng)ATCC細(xì)胞的生存環(huán)境是培養(yǎng)瓶、器皿或其他容器,生存空間及營(yíng)養(yǎng)是有限的。當(dāng)細(xì)胞增殖到一定密度后,分離出一部分細(xì)胞和更新營(yíng)養(yǎng)液,使細(xì)胞更好地生存,這一過程稱之為“傳代”
ATCC細(xì)胞實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果ATCC細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,若ATCC細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,用75%酒精擦拭后平躺置于培養(yǎng)箱內(nèi)。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,換成新鮮的培養(yǎng)基;如ATCC細(xì)胞還不貼壁,將細(xì)胞離心收集移到新的培養(yǎng)瓶中,原培養(yǎng)瓶加部分新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。對(duì)于懸浮細(xì)胞:收到細(xì)胞后,將ATCC細(xì)胞全部離心,去掉舊的培養(yǎng)基,換成新鮮的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
通過在支持物(如蓋玻片)上培養(yǎng)貼壁細(xì)胞,可以應(yīng)用抗體檢測(cè)細(xì)胞表面抗原的表達(dá)或進(jìn)行酶細(xì)胞化學(xué)以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。該方法的優(yōu)點(diǎn)是細(xì)胞貼壁牢固,能夠維持ATCC細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)的狀態(tài)。
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